豬冷凍精液人工輸精操作規程
發布時間：2021-08-27 瀏覽次數：4257次
豬精液的冷凍包括稀釋液的選用、精子冷凍和復蘇等處理技術，其難點在于阻止精子內部形成使精子致死的冰晶結構，同時提高精子活率，避免凍融過程中對精子頂體和質膜的損傷。豬人工授精技術體系由精液采集、保存和輸精等多個技術環節構成，在提高優秀種公豬和種母豬利用效率中發揮著重要作用，但豬人工授精涉及多個步驟，需要較高的操作技術、管理水平和經驗。
日趨規模化、集約化的中國養豬業對豬繁殖技術和生物安全性提出了更高要求，豬人工授精技術體系必將實現質的突破，從而加快我國從養豬大國走向養豬強國的步伐。豬冷凍精液人工授精技術應運而生，豬冷凍精液具有保存時間長、生物安全性高、運輸方便等優點，較好地彌補了豬人工授精技術的不足，對豬人工輸精操作要求也更為嚴格。冷凍精液的豬人工輸精方式多為深部輸精，深部輸精與普通輸精相比，能更好地利用有限的精液量，減少公豬采精壓力，提高公豬使用效率，降低固定成本。
20世紀50年代，人們開始研究豬精液冷凍保存技術，直到70年代才能將豬冷凍精液注入母豬輸卵，通過深部輸精的方法使母豬受精，之后各國才全面展開相關領域的研究。如今，在非洲豬瘟疫情形勢復雜嚴峻下，豬冷凍精液技術也在全國逐步推廣，以往的單純依靠活體引種和常溫精液配種已經不再是完整、安全、高效的繁育方法，豬冷凍精液技術既利于保種育種產業升級，又可提高公豬利用效率，減少公豬飼養量，減少豬場建設用地和設施，緩解環保壓力。
一、豬凍精解凍前準備
解凍工具準備：解凍液、顯微鏡、恒溫電熱板、玻片、恒溫水浴鍋、溫度計、 鑷子、剪子、杵棒、秒表、干燥毛巾、記號筆、筆記本等。
解凍室恒溫25～30℃；打開水浴鍋用溫度計量取水溫，溫度計與視線持平觀察，且溫度計處于水位中間位置不可觸碰鍋底，待溫度恒溫在37℃時放入稀釋液等待稀釋液恒溫至37℃（稀釋液放在鋼圈內防止傾倒）；打開另一個水浴鍋恒溫至50℃，校準方法同上；打開顯微鏡和恒溫電熱板（37～40℃），把蓋玻片和載玻片放在恒溫電熱板上預溫待檢精液活力。
二、豬凍精劑量及稀釋比例
每一支0.5毫升豬凍精細管為5億精子量。每1克解凍粉劑融于20克超純水中（充分溶解使用）。建議每瓶豬凍精輸精計量不低于同等級下的鮮精計量。
三、豬凍精解凍與稀釋
待稀釋液恒溫至37℃，另一水浴鍋的水恒溫至50℃時開始解凍。
1.凍精解凍操作要領
從液氮中取出4支或6支豬凍精（凍精一直保持在液氮面以下，從液氮罐向水浴鍋中夾精液時要“穩、準、快”，凍精取出暴露在空氣中時間不可超過5秒，應迅速放入水中解凍）迅速放入50℃恒溫水浴鍋內（確保放入水中的每支凍精，不起霜，不粘連，不漂浮），同時按下秒表16秒（取精液，放水中，按秒表需一氣呵成，勿出現“早按”“遲按”“錯按”和“忘歸零”等現象）后取出擦干，同時用棍棒把精液包捅到液氮面下，然后將空氣端口的精液甩至棉塞端，對齊剪開空氣端稀釋至37℃的稀釋液中，蓋蓋搖勻（迅速翻轉搖勻至少2次，保證精子不產生沉淀現象）。
精液細管在解凍時眼觀無明顯裂口破損現象，解凍過程中出現空氣端進水，解凍后不要晃動精液細管，避免水分與精液混合，應立即用剪刀剪掉進水部分，保證含有水分的部分不與稀釋液進行稀釋即不會影響產品質量。
2.凍精檢測
（1）在室溫25℃以上的條件下，取10微升稀釋并搖勻后的精液放在恒溫板上的載玻片上，蓋上蓋玻片鏡檢。
（2）精液解凍后在水浴鍋內復蘇5分鐘以上，再取樣放在載玻片上緩1～2分鐘即可檢測活力。
（3）鏡檢活力合格后做好記錄（耳號、品種、時間）或用記號筆標記。
（4）解凍好的精液要進行保溫，避光運輸或保存，建議20分鐘內輸精完畢。
四、深部輸精
1.清洗工作
先用千分之一的高錳酸鉀溶液清洗母豬后軀及尾根（從里到外，不洗陰戶），清洗完要停留15分鐘。再用清水清洗，用干毛巾擦干（每頭豬用一條毛巾，防止交叉感染）。最后用雙蒸水清洗母豬外陰內外側，并用干紙巾單方向擦干陰戶內側（疊紙巾時注意手指只接觸紙巾邊緣，防止污染紙巾）。
2.深部輸精管使用步驟
（1）拿到輸精管后，先檢查輸精管的氣密性是否完好，手握輸精管時要注意手離海綿球的距離［距離要合適（10～15厘米），以便操作，手不能直接接觸輸精管］。
（2）一手翻開母豬外陰，一手拿預潤滑過的輸精管（輸精管潤滑采用5毫升硫酸慶大霉素注射液替代潤滑劑效果更佳），先斜向下45°插入母豬陰戶，再斜向上45°逆時針旋轉插入母豬陰道，直至子宮頸口處（遇到阻力感）。
（3）接著準備插入內管，抓住外管后端，將內管插入（不能觸碰內管的末端），然后緩慢地向前推送內管，如果感到阻力時，應稍等一會，因為子宮頸未完全松弛。內管完全插入后，將外管往母豬體內再推深一點，如果此時內管回退，說明位置不正確，再次輕推內管，內管仍保持不動，可以實施授精。
（4）拿出預配精液，核對精液瓶標簽與母豬記錄卡是否相符。
（5）將精液單方向翻轉，使其均勻；將瓶蓋頭去掉，再擠掉幾滴精液，以保證精液瓶口暢通，同時去掉前端死精，讓空氣進入，使精液瓶恢復原狀。
（6）將精液瓶接在輸精管上，一手推住外管，一手拿精液并緩慢、持續擠入。
（7）輸精結束后將內管和輸精瓶一起抽出。抽出內管后，稍微抬高外管，并用手指刺激母豬外陰30秒，再將外管拔出。
（8）操作結束后，放公豬在配種通道上1～2小時，注意隔開通道，每區域按照公、母豬1∶10的比例放置，以促進精液吸收。
注意：豬凍精每次解凍稀釋后30分鐘內輸精完畢效果最佳，解凍后的精液在運送過程中必須放到配種箱、泡沫箱或裝有36℃水的保溫杯內和箱內，做好保溫措施（這樣做的目的是確保在精液活力最佳的時候給母豬輸精，避免反復冷熱應激而導致精子活力降低）。
五、結束語
嚴格遵守豬凍精技術操作要求，避免不當操作影響產品質量、影響母豬受孕能力，造成財產損失。豬精液冷凍保存技術可延長精液的保存時間，適應精液遠距離運輸，與豬人工授精技術配合應用，可以大幅度降低公豬的飼養數量和引種成本。雖然豬冷凍精液在產仔數和受孕率方面存在諸多不足，但豬冷凍精液的許多優點是常溫精液所不能達到的，豬冷凍精液人工授精技術的推廣與應用必將是今后養豬業的一個大趨勢，只有通過嚴格規范化管理才能取得較高的經濟效益。
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